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动物模型 | 胃癌原位移植瘤模型

180 人阅读发布时间:2024-12-10 10:58

 胃癌原位移植瘤模型

胃癌是一种常见的恶性肿瘤,我国的胃癌发病率高且其死亡率占各种恶性肿瘤之首位,严重危害我国人民健康。胃癌具有起病隐匿、易转移和复发、预后较差、症状表现多样以及患者群体特征显著等特点。在日常生活中保持健康的生活方式,定期进行体检和胃癌筛查,有助于及时发现并治疗胃癌。

胃癌肿瘤模型在医学研究和临床应用中具有重要作用,它们有助于深入了解胃癌的发病机制、评估药物疗效以及探索新的治疗方法。文献报道,可以通过使用胃癌细胞系MKN -45进行胃原位移植瘤模型构建[1]。具体步骤如下:

1、人胃癌细胞株:MKN-45-luc。

2、实验动物:BalB/C nude,4-6周龄,雌雄各半。

3、皮下成瘤:裸鼠左侧背部皮下接种MKN -45-luc细胞(1×107 细胞量,100uL)。当肿瘤长至直径约 1 cm,处死小鼠,用眼科剪及眼科镊剥取皮下瘤,并去除包膜及坏死组织,置于载玻片磨砂面研磨,同时滴加无菌生理盐水,去除纤维组织,将瘤块研磨成单细胞悬液。计数后再按上述方法传代至第3代。

4、胃原位移植:待小鼠皮下瘤直径长至 1 cm(约 2-3 周),处死小鼠,剥取皮下移植瘤,去除包膜及坏死组织,切成约 1 mm3的瘤块,手术原位移植到裸鼠胃浆膜层下。

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5、检测

(1)动物活体成像系统观察胃癌原位移植肿瘤的生长 术后 2 周后,裸鼠称重后异氟烷吸入麻醉,腹腔注射 D-荧光素钾盐底物(150 mg/kg),15 min后使用活体成像系统评价原位移植瘤的成瘤及肿瘤生长情况,每 4 天进行一次小动物活体成像。

(2)胃癌原位移植瘤的解剖学和组织病理检测

原位移植26 天后处死小鼠,解剖取材并观察造模及转移情况。取小鼠胃肿瘤组织、肿大淋巴结及肝转移灶组织,组织病理HE 染色分析

6、结果

① 胃癌原位移植肿瘤的活体生物发光成像

术后第 14d,在手术部位能够检测到荧光信号,证明肿瘤组织块已成功接种在胃壁上(图 3),原位成瘤率为 90%(18/20)。随着时间推移,裸鼠胃部荧光信号强度逐渐升高,范围逐步扩大(图 5)。

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② 裸鼠解剖学和病理

胃体增大,胃底扩张,移植局部均有肿瘤生长,肉眼见胃壁上有灰白色鱼肉状肿瘤,边界模糊,呈圆形或椭圆形,表面见结节状突起,高低不平,质硬,切面均质、鱼肉状,与肝、网膜,脾脏等脏器有不同程度粘连(图 4A)个别瘤体的肿瘤表面呈淡黄色外观,表面饱满,质韧,触之略有流动感,破溃流出坏死组织。

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参考文献:

[1]钱可扬.负载顺铂的可注射水凝胶在MKN-45人胃癌原位模型中的疗效评价[D].南京医科大学,2019.

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