动物模型 | 小鼠酒精性脂肪肝模型

酒精性肝病( alcoholic liver disease，ALD) 是由于过量摄入酒精导致的肝病。酒精性脂肪肝( alcoholic fatty liver，AFL) 是酒精性肝病最早期的病理学改变，早期脂肪肝通常没有明显的临床症状。AFL可进一步发展为肝炎、肝纤维化及肝硬化甚至肝癌。早期 AFL模型成功的建立，能帮助早期ALD患者有效地筛选药物，防止后续疾病的恶化。

有文献研究，通过酒精液体饲料和酒精加高脂饲料诱导2种 C57BL/6J 小鼠酒精性脂肪肝模型，并通过生物化学及组织病理学等方法进行比较，以筛选出较为高效的小鼠酒精性脂肪肝模型[1]。

1、实验动物：C57BL/6J 小鼠，6-8周龄，雄性，SPF级。

2、实验分组：维持饲料组、液体饲料对照组（TP4040C)、酒精液体饲料组（TP4030D)、高脂饲料组( MD12033)，共 4 个组( n = 6)。

3、造模：适应性饲养2周后，维持饲料组为阴性对照组，普通大小鼠维持饲料饲养、自由进食进水。液体饲料对照组为液体饲料阴性对照，按 TP4030C 液体对照饲料指导说明饲养、禁水；酒精液体饲料组按照Gao-Binge 模型建立及TP4030D 酒精液体饲料指导说明饲养、禁水；高脂饲料组进行60% 高脂饲料饲养自由进食，20%( V/V)酒精溶液自由饮用，每日更换。第16 天 7: 00～9:00，31. 5%( V/V) 酒精溶液灌胃，9h后动物标本取材。

4、取材检测

（1）小鼠体征及行动观察：小鼠体重及进食量变化 。

（2）肝质量及质量指数计算：小鼠取血完毕后，固定小鼠，开腹腔，取肝进行称量，计算其质量指数。

（3）血清生化指标含量测定：取血后，血浆 4℃ 静置 30 min，3500 r/min 离心15 min，得到分离血清，检测血清转氨酶（ALT、AST）、血脂（TG、TC）和血糖等生化指标。

（4）肝组织病理形态学分析：取血完毕后，取部分小鼠肝组织。拍照，HE 染色观察肝组织病理学变化，油红染色观察脂质沉积情况。

5、检测结果

（1）在短期（16d）的ALD建模周期内，酒精液体饲料组模型组（Gao-Binge 模型）和高脂饲料组都成功地诱导出C57BL/6J小鼠 AFL的模型，但酒精液体饲料组从生化指标水平及肝病理组织学等各项参数上，都显著优于酒精加高脂饲料模型组（图5、图6、图8、图9、图10）。

（2）酒精液体饲料诱导的Gao-Binge 模型建立方法，时间短、经济好、效率高，但短期内会引起模型动物体重持续减轻（图2），对实验动物的生理功能甚至存活是一个考验，适合急性AFL模型的建立。

（3）酒精加高脂饲料模型建立方法，虽在短期内 AFL 相应病理特征弱于 Gao-Binge 模型法，但体重未出现持续性减轻，相对而言较为温和，延长建模时间也能较好地复制 AFL 相应病理特征，因此更适合慢性 AFL 模型的建立。

参考文献：

[1] 杜冯,梁李铖,邹坤,等.两种C57BL/6J小鼠酒精性脂肪肝模型建立方法及比较[J].中国实验动物学报,2023,31(05):557-566.

[2] 高斌,常彬霞,徐明江.慢性酒精喂养加急性酒精灌胃的酒精性肝病小鼠模型(NIAAA模型或Gao-Binge模型)[J].传染病信息,2013,26(05):307-311.