动物模型 | 博来霉素肺纤维化小鼠模型

博来霉素肺纤维化小鼠模型

肺纤维化（pulmonary fibrosis，PF）是一种间质性肺疾病的终末期表现，其特征为成纤维细胞增殖及大量细胞外基质沉积，导致肺组织结构的破坏。肺纤维化的病因复杂多样，包括环境因素、药物、疾病因素和遗传因素等方面。肺纤维化目前缺乏有效的治疗药物，美国食品药品监督管理局（FDA）批准的吡非尼酮、尼达尼布虽然能在一定程度上改善临床症状，但存在副作用和药物耐受性问题，因此加强对肺纤维化的机制研究，对新药物研发具有重要意义。

博来霉素（bleomycin，BLM）诱导的肺纤维化模型，操作简单、可重复性强、与人类疾病的典型特征相似，是目前应用最广泛的PF动物模型方法[1]。

1、实验动物：C57BL/6小鼠，雄性，SPF 级，体质量（28±2）g。

2、实验分组：正常组，模型组。

3、BLM诱导造模：实验动物适应性饲养7天后，小鼠气管内滴注博来霉素，剂量为2.5mg/kg。21天后，取材检测。

4、模型检测

（1）肺系数检测：称量小鼠体重，处死小鼠，完整分离出双肺。 用PBS清洗干净肺组织表面的血迹，吸干肺组织表面水分，立即称量肺湿重， 计算肺系数。

 

（2）肺功能检测：将小鼠放置在全身体积描记系统的检测仓中，系统平衡后记录10min内气道狭窄指数（ Penh）、呼吸频率（frequency，f）和潮气量（ tidal volume，TV）等数值，评估小鼠的肺功能情况。

 

（3）肺组织病理检测：肺组织固定后，进行HE染色、Masson染色。

 

（4）免疫组化检测：α-SMA

 

（5）Western blot检测：α⁃SMA、p-Smad3、p-Smad2、Smad 2/3和TGF-β。 ​

 

 

5、模型特点

与正常组小鼠相比，模型组小鼠有以下特点：

① 肺质量、 肺系数升高。

② 肺功能相关的Penh值显著增加，f、TV明显降低 ，模型组的肺功能明显改变。

③ 肺泡腔缩小或萎陷，肺泡壁小叶间隔增宽，有大量炎性细胞浸润，大量胶原纤维沉积并有纤维节结生成，Ashcroft评分和胶原面积均升高。

④ 肺组织中的 α-SMA、p-Smad2、p-Smad3和TGF -β蛋白表达明显升高 ，表明BLM可以通过TGF-β/Smad通路诱导小鼠形成明显肺纤维化。

参考文献：

[1]冯嘉文,黄恺,景菲,等.扶正化瘀方调控TGF-β/Smad信号通路对博来霉素诱导小鼠肺纤维化的影响[J].中成药,2024,46(06):2042-2047.