动物模型 | 小鼠D-半乳糖亚急性皮肤衰老模型

小鼠D-半乳糖亚急性皮肤衰老模型

在皮肤老化的动物模型研究中，通常使用紫外线照射、化学物质处理和基因编辑等方法，来实现皮肤的老化诱导。UVB光老化模型，是最常见的外源性老化模型，老化机制与紫外线损伤胶原有关。D-半乳糖诱导的亚急性衰老模型，是最常见的内源性老化模型，老化机制与体内过多形成的自由基造成的细胞损伤有关。与UVB光老化模型相比，D-半乳糖诱导的皮肤衰老，更接近自然老化的状态。

D-半乳糖诱导的亚急性衰老模型，步骤如下：

1、实验动物选择：12周龄雌性昆明小鼠，体重30±2g，SPF级，标准饲料饲养。

2、实验分组：60只小鼠，随机分为三组，每组20只小鼠。

① 空白对照组

② D-半乳糖低剂量组

③ D-半乳糖高剂量组

3、选择小鼠背部皮肤为实验观察区域， 使用剃刀剃去小鼠背部长毛， 将 5%Na2S溶液涂抹于小鼠背部， 脱去绒毛。造模过程中每周脱毛 1 次。

4、小鼠背部皮下注射，每天注射1次，持续42天

① 对照组：生理盐水0.2ml

② D-半乳糖低剂量组：D-半乳糖 80mg/kg

③ D-半乳糖高剂量组：D-半乳糖 1000mg/kg

5、模型评估

给药周期结束后，取材，进行下列检测。

（1）眼球取血，检测全血中过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力。结果显示，和对照组相比，D-半乳糖高剂量组血液中CAT和GSH-Px的活力显著性降低。

（2）皮肤组织病理学形态观察

和对照组相比，高剂量组皮肤厚度、真皮厚度和弹力纤维总面积明显减少，而低剂量组变化不明显。

（3）皮肤生化指标检测

背部皮肤组织，称重，加入9倍质量的生理盐水，组织匀浆，检测皮肤中SOD和CAT活力、MDA和羟脯氨酸的含量。与对照组相比，高剂量组小鼠皮肤中SOD活力和羟脯氨酸含量明显降低，而MDA含量明显增多。

6、实验结果表明，小鼠D-半乳糖（1000mg/kg，每天1次）连续皮下注射42天，可以构建小鼠皮肤衰老模型。

参考文献

[1]王红丽,吴铁,钱聚标,等.D-半乳糖致衰老模型小鼠皮肤衰老的观察[J].中华老年医学杂志, 2004, 23(8):3.DOI:10.3760/j:issn:0254-9026.2004.08.014